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MICROBIOLOGÍA, ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y PARASITARIAS
DESDE LA GRANJA A LA MESA: SITUACIÓN DE ESCHERICHIA COLI
VEROCITOXIGÉNICA EN ARGENTINA
COLELLO Rocío, KRÜGER Alejandra, RUIZ Julia, SANSO Mariel, BUSTAMANTE
Ana, SANZ Marcelo, ARROYO Guillermo, FERNÁNDEZ Daniel, CADONA Jimena,
GONZALEZ Juliana, BURGAN Julia, CACERES Emilia, LUCCHESI Paula,
ETCHEVERRÍA Analía, PADOLA Nora.
Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología, Centro de Investigación Veterinaria de
Tandil (CIVETAN), CONICET, CICPBA, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA,
Pinto 399 (7000), Tandil, Argentina. [email protected]
INTRODUCCIÓN
Escherichia coli verocitotoxigénico (VTEC) es un patógeno emergente transmitido por
alimentos asociado a casos de diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico
hemolítico (SUH). Actualmente, nuestro país presenta el registro más alto de casos de
SUH a nivel mundial, con 500 casos nuevos declarados (Rivas et al., 2010). El
proceso de enfermedad en el hombre involucra la colonización del intestino y el daño
por acción de toxinas (VT1 y VT2). La colonización es el proceso por el cual VTEC
supera las defensas del huésped y se establece en el intestino (Gyles, 2007). El
mecanismo de adhesión mejor caracterizado en VTEC es el que involucra una
proteína de membrana externa que media la adherencia de la bacteria al enterocito,
codificada por el gen eae. Además, las VTEC pueden presentar otros factores de
virulencia tales como, enterohemolisina (codificada en el gen ehxA), fimbrias de
adhesión, una adhesina autoaglutinante codificada por el gen saa, una catalasaperoxidasa (KatP), una citotoxina (SubAB), entre otros (Etcheverría et al., 2013). La
plasticidad genómica de VTEC determina diferencias en virulencia y presenta un
desafío para su estudio. El objetivo principal de nuestro laboratorio ha sido evaluar el
rol de distintas especies animales, el medio ambiente y de las vías de transmisión de
VTEC hacia el hombre, así como la caracterización de la variabilidad genética y de
virulencia de las cepas VTEC.
MATERIALES Y MÉTODOS
Desarrollamos e implementamos diversas técnicas microbiológicas y moleculares.
Entre ellas se incluye PCR y sus tipos (RFLP-PCR, PCR en tiempo real), ELISA,
protocolos de enriquecimiento y selección de cepas VTEC a partir de distintas
muestras, y de cultivos para detección de toxinas y otros factores de virulencia y
métodos de subtipificación como RAPD, MLVA y MLST.
RESULTADOS
Las prevalencias de VTEC encontradas en bovinos fueron: del 22% en adultos en
pastoreo; 44%, adultos en matadero; 22%, terneros; 63%, animales de feedlot
(muestreos seriados), 38%, vacas de tambo; 43%, terneros de tambo. Además, se
encontró 23% de muestras vt-positivas en el medio ambiente de tambo, y 43% en
carne picada y hamburguesas de carnicerías. En la cadena productiva porcina, que
incluye granjas, frigoríficos, sala de desposte y boca de expendio, fue del 4% mientras
que en pollos la prevalencia aumenta desde el muestreo en carcasas hasta la venta de
0,1 % al 10%.
A partir del análisis de 650 aislamientos obtenidos de alrededor de 7000 muestras se
encontraron serotipos prevalentes tales como; O8:H19; O26:H11; O91:H21;
O113:H21; O117:H7; O130:H11; O145:H-; O157:H7; O171:H2 y O178:H19. Algunos
de estos serotipos fueron compartidos entre cepas aisladas de bovinos, pollos, cerdos,
alimentos y/o medio ambiente, y varios de ellos han sido encontrados en cepas
asociadas a casos de SUH. Entre los genes estudiados, los perfiles de virulencia
predominantes fueron vt2, vt2/ehxA/saa, vt1/vt2/ehxA/saa y vt2/eae/ehxA,
encontrandose diferencias en relación al del cada aislamiento. La caracterización
detallada de aproximadamente 200 aislamientos mostró variabilidad en los genes vt,
eae, y saa, en los perfiles MLVA y en la citotoxicidad sobre células Vero.
DISCUSIÓN
En distintos países, entre los que se incluye a la Argentina, se realizaron numerosos
estudios sobre la prevalencia de VTEC que permitieron confirmar el rol del ganado
bovino como principal reservorio. Sin embargo, otros animales pueden ser portadores
de VTEC como cerdos, pollos, perros, gatos, animales silvestres, entre otros (Padola
et al., 2004; Fernandez et al., 2010; Alonso et al., 2012; Amezquita-lopez et al., 2014).
En los últimos años se ha logrado un gran progreso en el conocimiento de la ecología
de VTEC en los reservorios animales y en las formas de transmisión al hombre. Pero,
por otra parte, la gran diversidad de VTEC, las diferencias en virulencia y la
emergencia de nuevas cepas presentando un desafío para su estudio.
CONCLUSIONES
Nuestros estudios muestran que los bovinos, los pollos y los cerdos de nuestro país
son reservorio de cepas VTEC y en donde la principal vía de transmisión son los
alimentos. Las características de estas cepas, en relación a sus serotipos, genes de
virulencia, particularmente toxinas y citotoxicidad, reflejan un alto potencial patogénico
tanto para infectar como para desarrollar enfermedad en humanos. Más estudios son
necesarios para entender la interacción que existe entre VTEC y el huésped para
poder evaluar estrategias de control en toda la cadena de producción.
BIBLIOGRAFÍA
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RIVAS M, PADOLA NL, LUCCHESI PMA, MASANA M. Diarrheagenic Escherichia coli
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