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se utilizará terapéuticamente, ya que se optó por no
utilizar el gluconato de calcio para evitar la sensación
de quemazón que siente el paciente. Considerando el
modelo celular de la coagulación y que sobre la superficie plaquetar, el complejo protrombinasa (factores Xa,
Va y Ca2+) cataliza la conversión de protrombina en grandes cantidades de trombina, se puede pensar que si se
utiliza plasma rico en plaquetas en lugar de plasma fresco congelado, es posible que los sobrenadantes de
trombina obtenidos posean mayor concentración y actividad de esta enzima, lo que favorecería los tiempos
de gelificación obtenidos en este ensayo, sin embargo
se sacrificaría parte del volumen del concentrado de
plaquetas que se utiliza para los geles plaquetarios.
Potier y colaboradores1 determinaron el efecto sobre las propiedades biofísicas del gel de fibrina, en una
combinación de cinco componentes: la concentración
de fibrinógeno, trombina, iones de calcio, iones de cloruro y factor XIII (todos materiales liofilizados). Mantuvieron estables las concentraciones de fibrinógeno y
trombina, y probaron distintas variaciones de los demás componentes. Se vio que se obtenían geles “opacos” a altas concentraciones de calcio y bajas de cloruro, estos geles presentaban un mayor tamaño de sus
fibras y una rigidez reducida; mientras que se obtenían
geles translucidos a bajas concentraciones de calcio y
altas de cloruro, los cuales presentaban mejores propiedades elásticas. Los geles translucidos al contener
mayor concentración de factor XIII presentaban mayor
resistencia a la fibrinólisis, ya que al tener hebras de
fibrina más delgadas y ramificadas, estas tienden a
degradarse más lentamente. La opacidad de los geles
de fibrina y su estructura se ven afectados por el contenido de calcio y cloruro, lo que también se ha ligado
a la fuerza iónica de la solución de gelificación.
En este ensayo la solución de gluconato de calcio al
10% contiene 0.465 mEq (9.3 mg) de calcio total por cada
mililitro. Este fue el único valor que se conocía con exactitud. En los plasmas solo se conoció el contenido de
fibrinógeno, lo cual tendió a variar en función del donante. Se desconoce el contenido del factor XIII de los plasmas, aunque igualmente se supone que su concentración varía con el donante. El trabajo con plasmas no puede ser controlado en muchas variables que influencian
la velocidad de gelificación y la estructura de las hebras de fibrina y por lo tanto las características del gel
a aplicar varían de paciente en paciente (o donante en
donante).
En un periodo de prueba previo, se observó que las
mezclas de plasma pobre en plaquetas y gluconato de
calcio para producir sobrenadante de trombina, así
como las mezclas de gelificación (plasma, gluconato
de calcio y sobrenadante de trombina) tendían a presentar una gelificación muy lenta en tubo de
polipropileno (tubo de 15 mL); más de una hora y poco
menos o poco mas de 10 minutos, respectivamente
(datos no suministrados).
Se sabe que el vidrio, como material tiene un efecto
sobre los factores de contacto que puede beneficiar la
coagulación9.
Pág. 152
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En esta etapa, los geles de fibrina siempre fueron
estables y firmes, mientras que los geles de plaquetas
siempre se retrajeron (aunque a distintos ritmos). Para
explicar este comportamiento se ideó la hipótesis que
dentro de la estructura del gel, los factores de crecimiento concentrados liberados por las plaquetas activadas se difunden entre las hebras de fibrina y al salir
del gel hacia las paredes del tubo, crean un desequilibrio de presión osmótica lo cual causa la retracción del
coágulo y disminución de su volumen por salida de agua
desde su interior. Los geles de fibrina fueron producidos con plasma fresco congelado, tomando en cuenta
que el fraccionamiento de los hemocomponentes en
bolsa de recolección deja conteos bajos de plaquetas
remanentes en el plasma y que el hecho de congelar
este plasma destruye las células restantes, se puede
considerar al plasma fresco congelado con cero
plaquetas por microlitro y con niveles bajos de los factores de crecimiento plaquetarios; lo que contribuye a
que no se presente la retracción del coágulo observada para los geles de plaquetas.
La trombina disponible comercialmente, principalmente corresponde a trombina concentrada y purificada (proveniente de plasmas humanos y animales), y trombina
“fresca” autóloga concentrada.9 Debido a la fuerte tendencia al uso de trombina comercialmente disponible y
trombina autóloga recién extraída, no se encontró ensayos que evaluaran la trombina congelada, extraída de forma similar a la utilizada en este trabajo. Los resultados
anteriormente descritos para esta sección muestran una
tendencia a aumentar los tiempos de gelificación en la
mayoría de los casos. Lo cual se podría atribuir a la pérdida de actividad enzimática de la trombina durante la congelación en tubo de polipropileno.
CONCLUSION
Las características del plasma sanguíneo (como el
contenido de fibrinógeno y los tiempos de coagulación)
varían enormemente entre individuos, lo cual puede tener un efecto en los tiempos de gelificación y en las
estructuras internas de hebras de fibrina de los geles,
por lo que la calidad de estos productos será variable.
En este ensayo, en el que se probaron mezclas sencillas de plasma-gluconato de calcio-trombina se determinó que el procedimiento de (6:0.5:1.5) parece ser el
más adecuado (para ambos tipos de gel).
REFERENCIAS
1. Potier E, Noailly J, Sprecher Ch, Ito K. Influencing Biophysical
Properties of Fibrin with Buffer Solutions. J Mater Sci 2010; 45:
2494-2503.
2. Janmey P, Winer J, Weisel J. Fibrin Gels and their Clinical and
Bioengineering Applications. J. R. Soc. Interface 2009; 6: 1-10.
3. Zimmermann R, Jakubietz R, Jakubietz M, Strasser E, Schlegel
A, Wiltfang J, et al. Different preparation methods to obtain platelet components as a source of growth factors for local application. Transfusion 2001; 41(10): 1217–24.
Vol. XXXVIII / N° 2 / 2012
Págs. 147 / 153
Cerdas-Quesada, César;
Gamboa Cordero, Bernardo;
Valverde Calderón, Giselle